期刊简介
本刊为中国工程院院士，上海第二军医大学东方肝胆外科医院院长吴孟超教授主编，由安徽医科大学、中华医学会肝外科学组共同主办的肝胆外科专业高级学术期刊，自1993年创刊年以来，本刊一贯坚持高质量、高标准的办刊方针，向世界优秀医学刊物学习，先后举办了两届全国肝胆外科学术会议，受到海内外医学同道的一致好评，深受广大外科学医务、教研人员的喜爱。
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首页>肝胆外科杂志
- 杂志名称：肝胆外科杂志
- 主管单位：
- 主办单位：安徽医科大学
- 国际刊号：1006-4761
- 国内刊号：34-1143/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：1995年安徽省优秀科技期刊期刊收录：国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏
诱导型一氧化氮合酶基因真核表达载体的构建与表达
邱江锋；吴志勇；罗春霞
关键词：一氧化氮, 真核表达载体, 转染
摘要：目的构建诱导型一氧化氮合酶基因真核表达载体pcDNA3/iNOS,并以脂质体为介导观察其在肝窦内皮细胞中的转染效率及表达情况.方法先用限制性核酸内切酶HincⅡ+ClaⅠ酶切质粒PSP/iNOS和PUC6s,构建PUC6s/iNOS中间质粒,再用HindⅢ+Xhol酶切质粒PUC6s/iNOS和pcDNA3,构建pcDNA3/iNOS重组质粒,鉴定正确后以Lipofectamine为介导将其与pEGFP共转染分离培养的大鼠肝窦内皮细胞,在荧光显微镜下计算转染效率并用RT-PCR和Western blot检测iNOS基因的表达.结果成功构建了诱导型一氧化氮合酶基因真核表达载体pcDNA3/iNOS,以脂质体为介导转染肝窦内皮细胞后其转染效率为35.6%±3.4%,用RT-PCR和Western blot检测到相应的iNOSmRNA和蛋白.结论以脂质体介导的iNOS基因能高效转染内皮细胞并表达相应的基因产物.
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