期刊简介
本刊为中国工程院院士，上海第二军医大学东方肝胆外科医院院长吴孟超教授主编，由安徽医科大学、中华医学会肝外科学组共同主办的肝胆外科专业高级学术期刊，自1993年创刊年以来，本刊一贯坚持高质量、高标准的办刊方针，向世界优秀医学刊物学习，先后举办了两届全国肝胆外科学术会议，受到海内外医学同道的一致好评，深受广大外科学医务、教研人员的喜爱。
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首页>肝胆外科杂志
- 杂志名称：肝胆外科杂志
- 主管单位：
- 主办单位：安徽医科大学
- 国际刊号：1006-4761
- 国内刊号：34-1143/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：1995年安徽省优秀科技期刊期刊收录：国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏
pIRES2-EGFP/CCK质粒的构建及其在仓鼠体内表达
吕毅；白纪刚；王浩华；禄韶英
关键词：胆囊收缩素, 骨骼肌, 细胞转染, 绿色荧光蛋白, COS-7细胞
摘要：目的胆囊收缩素(Cholecystokinin,CCK)在胰腺癌的发生发展中起着很重要得作用,本实验的目的是构建猪源性CCK基因真核表达质粒pIRES2-EGFP/CCK,并在哺乳动物细胞COS-7中和仓鼠体内进行表达.方法从含CCK的中介载体pMD18-T/CCK中,以限制性内切酶方法获取目的片段,将其克隆入真核表达载体pIRES2-EGFP中,以脂质体法转染COS-7细胞,利用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,同时采用肌肉注射法免疫仓鼠,了解重组质粒pIRES2-EGFP/CCK的体内表达.结果构建了猪CCK基因的重组真核表达质粒pIRES2-EGFP/CCK,用其转染COS-7细胞后24h、48h、72h均可检测到绿色荧光蛋白的表达,其中72h组荧光强度达到强.用pIRES2-EGFP/CCK免疫仓鼠后,第4天注射部位可以检测到绿色荧光蛋白的表达,第14天荧光强度明显增强,第42天荧光强度进一步增强,正常对照组始终未检测到绿色荧光蛋白的表达.结论成功构建了猪源性CCK基因真核表达质粒pIRES2-EGFP/CCK,并成功地在哺乳动物细胞COS-7中和仓鼠体内进行了表达,为仓鼠胰腺癌模型的交叉免疫治疗奠定了基础.
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