期刊简介
本刊为中国工程院院士，上海第二军医大学东方肝胆外科医院院长吴孟超教授主编，由安徽医科大学、中华医学会肝外科学组共同主办的肝胆外科专业高级学术期刊，自1993年创刊年以来，本刊一贯坚持高质量、高标准的办刊方针，向世界优秀医学刊物学习，先后举办了两届全国肝胆外科学术会议，受到海内外医学同道的一致好评，深受广大外科学医务、教研人员的喜爱。
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首页>肝胆外科杂志
- 杂志名称：肝胆外科杂志
- 主管单位：
- 主办单位：安徽医科大学
- 国际刊号：1006-4761
- 国内刊号：34-1143/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：1995年安徽省优秀科技期刊期刊收录：国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏
pcDNA3.1(+)-ABCG2真核表达载体的构建与鉴定
罗维欢；江春平；丁义涛
关键词：真核表达载体, ABCG2阴性SMMC7721肝癌细胞, ABCG2
摘要：目的 构建人的ABCG2基因真核表达载体pcDNA3.1(+)-ABCG2,并在ABCG2阴性SMMC7721肝癌细胞中表达.方法 以人的癌细胞为材料提取RNA,经反转录得到cDNA,利用PCR方法,根据人ABCG2基因62526032(NM_004827.2)序列信息设计引物,扩增ABCG2基因的CDS序列,将其克隆到pcDNA3.1+表达载体中.酶切及测序鉴定重组质粒正确后,脂质体介导转染至ABCG2阴性SMMC7721肝癌细胞中.采用Western blot法检测外源基因ABCG2的表达.结果 PCR扩增片段大小与理论片段大小相符,酶切大小与理论大小相符,阳性的克隆测序鉴定正确,表明人ABCG2基因克隆及真核表达载体pcDNA3.1(+)-ABCG2构建成功.在蛋白水平,转染72h后的细胞中外源基因ABCG2表达均明显增加.结论 成功构建重组真核表达载体pcDNA3.1(+)-ABCG2,并在ABCG2阴性SMMC7721肝癌细胞中进行了表达.
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